Imunohistokemija

Imunohistokemija (IHC) je laboratorijska tehnika koja se koristi za određivanje lokalizacije i količine proteina i drugih molekula unutar stanica i tkiva. Ova metoda omogućuje mikroskopsku analizu tkiva koristeći protutijela za detekciju specifičnih antigena. IHC se često primjenjuje u područjima kao što su patologija, biologija i medicinska istraživanja.

Ključne značajke imunohistokemije

1. Specifičnost cilja: IHC koristi protutijela dizajnirana za prepoznavanje specifičnih proteina, glikoproteina i drugih molekula, omogućujući preciznu detekciju u stanicama i tkivima.
2. Vizualizacija: Provezivanje protutijela s ciljnim molekulama proizvodi specifičan signal, koji se obično prikazuje kao reakcija u boji ili fluorescentni signal, omogućujući vizualizaciju pod mikroskopom.
3. Kvantifikacija: IHC se može koristiti za određivanje količine specifičnih proteina ili molekula, obično putem analize gustoće ili drugih metoda mjerenja.

Proces imunohistokemije

1. Priprema tkiva i stanica: Tkiva ili stanice se režu i postavljaju na stakalca za mikroskop. Obično se sekcije tkiva obrađuju parafinom ili zamrzavaju kriogeno.
2. Izlaganje antigena: Tkivne sekcije podvrgavaju se kemijskim tretmanima kako bi antigeni postali dostupniji za vezanje s protutijelima.
3. Dodavanje primarnih protutijela: Primarna protutijela, koja prepoznaju specifične molekule cilja, dodaju se na tkivo. Ona se vežu za ciljne molekule.
4. Upotreba sekundarnih protutijela: Sekundarna protutijela, koja se vežu na primarna, dodaju se i obično proizvode signal (npr. reakciju u boji ili fluorescentni signal).
5. Vizualizacija: Tkivne sekcije pregledavaju se pod mikroskopom kako bi se detektirali signali. Boje ili fluorescentni signali ukazuju na lokaciju i distribuciju ciljnih molekula.
6. Analiza rezultata: Dobiveni podaci i slike analiziraju se kako bi se odredila količina i distribucija proteina ili molekula.

Područja primjene imunohistokemije

1. Patologija: Dijagnoza i klasifikacija karcinoma, određivanje karakteristika tumora i procjena odgovora na terapiju.
2. Osnovna biološka istraživanja: Proučavanje lokacije i interakcija proteina unutar stanica u molekularnoj biologiji i biologiji stanica.
3. Medicinska istraživanja: Razumijevanje mehanizama bolesti i identifikacija novih ciljeva za liječenje.
4. Forenzičke znanosti: Detekcija i analiza biomolekula u uzorcima za sudsku medicinu.
5. Klinička istraživanja: Određivanje i analiza razina ekspresije proteina u kliničkim uzorcima.

Imunohistokemija je snažan alat za detekciju specifičnih proteina i molekula u biološkim uzorcima te ima ključnu ulogu u brojnim znanstvenim i medicinskim primjenama.