Kısa zincirli yağ asitleri (KZYA) prebiyotiklerin bağırsak mikrobik fermantasyonu, özellikle sindirilmemiş diyet karbonhidratları, dirençli nişastalar ve diyet lifleri tarafından üretilen organik asitlerdir. Temel olarak, KZYA’lar mikrobiyotanın metabolik etkilerinin ve besin kaynakları ile etkileşimlerinin ürünleridir. KZYA seviyeleri obezite ve diyabet ile yakından ilişkilidir: Bağırsak mikrobiyota obeziteyi ve tip 1 ve tip 2 diyabetes mellitus (T1D ve T2D) gelişimini açıkça etkilediği görülmektedir. Asetat, propionat ve bütirat-sistemimizdeki en bol bulunan KZYA’lar-bağırsak mikrobiyotası tarafından kabaca 3:1:1 oranında üretilir. Çoğu doğrudan kolonositlerde metabolize edilir; geri kalanı karaciğer, kas, böbrek, beyin ve kalbe enerji sağlayan hepatik portal dolaşımına emilir. Bağırsak epiteline emilen asetat, asetil CoA’ya dönüştürüldükten sonra trikarboksilik asit (TCA) döngüsüne (sitrik asit döngüsü veya Krebs döngüsü olarak da bilinir) girer ve ATP, kolesterol ve yağ asitleri üretir. Propionat, karaciğere ulaşmadan önce bağırsakta glukoneogenez için bir substrattır. Bağırsak epitelinden de novo sentezlenmiş glikoz, portal venden kaynaklanan bağırsak-beyin nöral devresi tarafından algılanır ve bu da insülin duyarlılığını ve glukoz toleransını artırır.
Kit Özellikleri
Toplam 13.3 dk analiz süresi
KZYA’ların eş zamanlı analizi
Küçük hacimlerde numune gereksinimi
Uzun ömürlü GC kolonu
Parametreler
Asetik asit, Propiyonik asit, Isobutirik asit, Butirik asit, Isovalerik asit, Valerik asit, 4-Metilvalerik
asit, Hekzanoik asit, Heptanoik asit.
Numune Türü
Serum/Plazma, Dışkı
Özellikler
Numune Hazırlama
Serum/Plazma Numune Hazırlığı
Aşama 1
200 μl serum örneği ependorf içerisine alınır
Aşama 2
20 μl internal standart ve 15 μl Reaktif-1 numune üzerine eklenerek 10 sn vortexlenir
Aşama 3
300 μl Reaktif-2 ilave edilerek 15 dakika çalkalayıcıda bekletilir. 10000 rpm’de 10 dakika santrifüj edilir
Aşama 4
Üst fazdan 200 μl HPLC viali içerisine alınır
Aşama 5
Alt faz üzerine yeniden 300 μl Reaktif-2 eklenir ve 10 sn vortexlenerek 10000 rpm’de 10 dakika santrifüj edilir
Aşama 6
Üst fazdan 200 μl aynı HPLC vialine alınarak üst fazlar birleştirilir
Aşama 7
Elde edilen ekstrakt 20 μl Reaktif-3 ile muamele edilerek 10 sn vortexlenir
Aşama 8
60°C’de 30 dk inkübasyona bırakılır
Aşama 9
Oda koşullarına gelen numune GC-MS sistemine enjekte edilir
Numune Hazırlama
Dışkı Numune Hazırlığı
Aşama 1
30 mg fekal numune santrifüj tüpüne tartılır
Aşama 2
1 ml deiyonize su eklenir ve 15 dk mekanik karıştırıcıda çalkalanır ve 15 dakika 2-8°C’de bekletilir
Aşama 3
10000rpm’de 10 dakika santifüj edilir
Aşama 4
Üst fazdan 50 μl serum örneği ependorf içerisine alınır
Aşama 5
20 μl internal standart ve 15 μl Reaktif-1 numune üzerine eklenerek 10 sn vortexlenir
Aşama 6
300 μl Reaktif-2 ilave edilerek 15 dakika çalkalayıcıda bekletilir. 10000 rpm’de 10 dakika santrifüj edilir
Aşama 7
Üst fazdan 200 μl HPLC viali içerisine alınır
İlgili Ürünler
Serum/Plazmada D Vitamini HPLC Analiz Kiti
D vitamini iskelet metabolizmasında, kalsiyum homeostazında ve ayrıca...
B1, B2, B6 Vitaminleri LC-MS/MS Analiz Kiti
B1 vitamini, B2 vitamini ve B6 vitamini suda çözünen ve çeşitli biyolo...
Serum/Plazmada A&E Vitamini LC-MS/MS Analiz Kiti
A vitamini, sağlıklı mukoza zarları, cilt, görme, bağışıklık sistemini...
Kapsamlı Yağ Asidi Profili GC-MS Analiz Kiti
Yağ asitleri biyolojik sistemlerdeki temel moleküllerdir ve hücre zarl...
D Vitamini LC-MS/MS Analiz Kiti
D vitamini, iskelet metabolizmasında, kalsiyum homeostazında ve ayrıca...
K Vitamini LC-MS/MS Analiz Kiti
K vitamini, K vitaminine bağımlı Gla proteinlerinde glutamik asit kalı...
Serumda Omega Yağ Asitleri GC-MS Analiz Kiti
Çoklu doymamış yağ asitleri (PUFA) önemli fizyolojik fonksiyonlara sah...
Teknoloji
Gaz Kromatografisi
Gaz kromatografisi, bir karışımda gaz halinde bulunan veya kolayca buharlaştırılabilen bileşenlerin birbirinden ayrıştırılması ve analiz edilmesinde kullanılan yöntemdir.
İşlemin kısa sürede ve çok duyarlı bir şekilde tamamlanması met...
Daha Fazla